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分享資生堂色譜柱流動(dòng)相中緩沖鹽的正確使用方法
更新時(shí)間:2021-12-24   點(diǎn)擊次數(shù):1326次
  如果是遇到堵塞的情況,先要確定堵塞是由于什么原因引起的,如果是由于F92533資生堂色譜柱中殘留的緩沖鹽引起的,這是輕微的堵塞了,可以嘗試用高比例的水相在較高的溫度下沖洗色譜柱。
 
  如果是由于樣品原因?qū)е律V柱堵塞,又要考慮另外的辦法,如果是樣品中含有太多吸附性很強(qiáng)的物質(zhì)(有時(shí)是復(fù)雜樣品中的某些雜質(zhì),無法通過過濾離心等辦法去除)沉積吸附在柱頭導(dǎo)致堵塞,可以嘗試使用不同的溶劑(對(duì)此類物質(zhì)有較好溶解性的)慢慢沖洗。
 
  如果是由于樣品過濾不當(dāng)或者樣品在色譜柱上析出導(dǎo)致某些顆粒雜質(zhì)堵塞了色譜柱,除了嘗試尋找合適溶劑沖洗之外,只能考慮反沖了,通常,不建議反沖色譜柱,因?yàn)榭赡軐?duì)色譜柱造成較大損害,所以反沖是迫不得已的死馬當(dāng)活馬醫(yī)的辦法,一定要慎用。做好樣品的前處理并使用預(yù)柱或在線過濾器才是保護(hù)色譜柱的好辦法!
 
  F92533資生堂色譜柱流動(dòng)相中緩沖鹽的正確使用方法:
 
  1、使用前的處理:在使用緩沖鹽作流動(dòng)相之前需要用不含緩沖鹽的流動(dòng)相沖洗色譜柱,直至基線平穩(wěn)。原則上,用于沖洗的流動(dòng)相與分析時(shí)所用的流動(dòng)相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于沖洗用的流動(dòng)相中不含緩沖鹽。理由:緩沖鹽通常易溶于水,難溶于有機(jī)溶劑。用含緩沖鹽的(特別是做流動(dòng)相的水為飽和的緩沖鹽溶液時(shí))流動(dòng)相進(jìn)行分析時(shí),如果分析前色譜柱中用于保存色譜柱的流動(dòng)相中含水的比例相對(duì)較小,不先沖洗掉,接下來做樣品的時(shí)候所用的流動(dòng)相中如果有機(jī)溶劑含量大,而其比例中所含的水又不足以溶解該緩沖鹽時(shí),緩沖鹽將會(huì)在色譜柱柱體上析出,沉積下來,這將可能導(dǎo)致上述對(duì)色譜柱的損害。
 
  2、使用后的處理:用與分析時(shí)含水比例相同的流動(dòng)相(與分析用流動(dòng)相的區(qū)別是,用于沖洗的流動(dòng)相不含緩沖鹽)進(jìn)行沖洗,直至基線平穩(wěn)。如果F92533資生堂色譜柱在接下來很長的一段時(shí)間內(nèi)不使用,要長期保存,則需再加上一步,即用純的有機(jī)溶劑沖洗一遍,直至基線平穩(wěn)。

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